دوره 34، شماره 4 - ( تیر 1405 )
جلد 34 شماره 4 صفحات 10176-10163 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Ethics code: IR. IHU. REC. 1401-08-26
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Bakhshian M, Honari H, Samiei Abianeh H, Aghaie S M. Expression of Soluble c-CfTXB Protein from Chironex fleckeri Jellyfish Fused to SUMO Tag in Escherichia coli BL21 (DE3) and Evaluation of Immunogenicity in Syrian Mice. JSSU 2026; 34 (4) :10163-10176
URL: http://jssu.ssu.ac.ir/article-1-6512-fa.html
URL: http://jssu.ssu.ac.ir/article-1-6512-fa.html
بخشیان مهدی، هنری حسین، سمیعی ابیانه حسین، آقایی ُسید مجتبی. تولید پروتئین محلول c-CfTXB عروسدریایی Chironex fleckeri متصل به تگ سامو در اشریشیاکلی Bl21(DE3) و بررسی ایمنیزایی آن در موش سوری. مجله علمي پژوهشي دانشگاه علوم پزشكي شهید صدوقی يزد. 1405; 34 (4) :10163-10176
چکیده: (23 مشاهده)
مقدمه: عروسدریایی Chironex fleckeri از گونههای تولیدکننده توکسینهای پروتئینی است که اثرات سایتوتوکسیک و نوروتوکسیک آنها بر موجودات زنده به اثبات رسیده است. به علت حضور انواع پروتئینهای فعال زیستی در توکسین این جاندار، فلج موقت یا حتی مرگ در شرایط حاد مشاهده شده است. هدف از این مطالعه، محلولسازی و بررسی ایمنیزایی پروتئین مهندسیشده c-CfTXB متصل به تگ سامو بهعنوان یک آنتیژن نوترکیب و مقایسه پاسخ ایمنی آن با فرم بدون تگ در مدل حیوانی بود.
روش بررسی: در این مطالعه تجربی هضم آنزیمی برای برش قطعه ژنی StXB از وکتور pET-28aSUMO-c-CfTXB-StXB انجام شد. سپس بیان پروتئینهای نوترکیبSUMO-c-CfTXB وc-CfTXB در میزبان پروکاریوتی مستعد با القاء IPTG انجام و پس از آن به کمک ستون کروماتوگرافی Ni-NTA خالصسازی گردید. وسترنبلاتینگ جهت تایید پروتئینها انجام پذیرفت. پس از ایمنسازی گروههای موشی، تیتر آنتیبادی با روش الایزا و قابلیت حفاظتی واکسن با چالش توکسین ارزیابی گردید. دادهها از نرمافزار SPSS version 16 با و با آزمون ANOVA یکطرفه و تحلیل بقا پردازش شدند.
نتایج: طی بیان و جداسازی موفق پروتئینها با SDS-PAGE، مشخص شد که تگ سامو باعث محلول شدن پروتئین هدف گردیده است. در آزمون چالش و مقابله با توکسین، تنها گروههای واکسینهشده به سبب ایجاد اختلاف معنیدار در میزان آنتیبادی تولیدشده، بقاء 100%خود را حفظ کردند.
نتیجهگیری: اتصال تگ SUMO به پروتئین مهندسیشده c-CfTXB باعث بهبود تاخوردگی پروتئین هدف و نهایتا بهبود بیان، میزان تخلیص و سهولت آن گردید. این نتایج میتواند در طراحی واکسنهای نوترکیب برای مقابله با زهر عروسهای دریایی با توجه به ایمنیزایی موفق آنتیژن در مدل موشی، مؤثر باشد.
روش بررسی: در این مطالعه تجربی هضم آنزیمی برای برش قطعه ژنی StXB از وکتور pET-28aSUMO-c-CfTXB-StXB انجام شد. سپس بیان پروتئینهای نوترکیبSUMO-c-CfTXB وc-CfTXB در میزبان پروکاریوتی مستعد با القاء IPTG انجام و پس از آن به کمک ستون کروماتوگرافی Ni-NTA خالصسازی گردید. وسترنبلاتینگ جهت تایید پروتئینها انجام پذیرفت. پس از ایمنسازی گروههای موشی، تیتر آنتیبادی با روش الایزا و قابلیت حفاظتی واکسن با چالش توکسین ارزیابی گردید. دادهها از نرمافزار SPSS version 16 با و با آزمون ANOVA یکطرفه و تحلیل بقا پردازش شدند.
نتایج: طی بیان و جداسازی موفق پروتئینها با SDS-PAGE، مشخص شد که تگ سامو باعث محلول شدن پروتئین هدف گردیده است. در آزمون چالش و مقابله با توکسین، تنها گروههای واکسینهشده به سبب ایجاد اختلاف معنیدار در میزان آنتیبادی تولیدشده، بقاء 100%خود را حفظ کردند.
نتیجهگیری: اتصال تگ SUMO به پروتئین مهندسیشده c-CfTXB باعث بهبود تاخوردگی پروتئین هدف و نهایتا بهبود بیان، میزان تخلیص و سهولت آن گردید. این نتایج میتواند در طراحی واکسنهای نوترکیب برای مقابله با زهر عروسهای دریایی با توجه به ایمنیزایی موفق آنتیژن در مدل موشی، مؤثر باشد.
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
زیست شناسی
دریافت: 1404/6/18 | پذیرش: 1405/4/15 | انتشار: 1405/4/15
دریافت: 1404/6/18 | پذیرش: 1405/4/15 | انتشار: 1405/4/15
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
