Oveisi A, Mortazavizadeh M, Arjmand M, Fazli H, Sheikhha M. Examination and Comparison of Various Methods of DNA Extraction from Samples of Blood, Bone Marrow Slides and Peripheral Blood. JSSU 2009; 17 (3) :149-157
URL:
http://jssu.ssu.ac.ir/article-1-124-fa.html
اویسی افروز، مرتضوی زاده سید محمدرضا، ارجمند مهدی، فضلی حسین، شیخها محمدحسن. بررسی و مقایسه روشهای استخراج DNA از نمونه خون و اسلایدهای مغز استخوان و خون محیطی. مجله علمي پژوهشي دانشگاه علوم پزشكي شهید صدوقی يزد. 1388; 17 (3) :149-157
URL: http://jssu.ssu.ac.ir/article-1-124-fa.html
چکیده: (23536 مشاهده)
مقدمه: روشهای استخراج DNA برای انجام تحقیقات ژنتیک و همین طور آزمایشات تشخیص طبی جهت بیماریهایی که منشاء ژنتیک دارند حائز اهمیت است. همچنین در مورد سرطانها استفاده از روشهای استخراجDNA و بررسی ژنی در طول مراحل درمان، بعنوان یکی از روشهای آزمایشگاهی مطرح میباشد. حال بررسی آنکه کدام روش استخراج DNA و استخراج از چه نمونهای بهترین نتیجه را می دهد بسیار مهم خواهد بود.
روش بررسی: در این تحقیق از ٥ نمونه مختلف شامل ١- خون ٢- اسلاید مغز استخوان آرشیوی رنگ شده به روش گیمسا ٣- اسلاید خون محیطی آرشیوی رنگ شده به روش گیمسا ٤- اسلاید خون محیطی تازه رنگ شده به روش گیمسا و ٥- اسلاید خون محیطی رنگ نشده، با سه روش ١- نمک زدن٢- جوشاندن و ٣- فنل– کلروفرم،DNA استخراج شد. در این تحقیق سه پارامتر کیفیت (Optimal Density:OD)، کمیت (غلظت DNA ) و بازدهی یا وضعیت PCR:Polymerase Chain Reaction مورد بررسی قرار گرفت.
نتایج: بهترین کیفیت در نمونه خون با روش نمک زدن (74/1) و کمترین کیفیت در تمام نمونههای مورد بررسی با روش جوشاندن حاصل شد و در مورد اکثر نمونهها روش نمک زدن و فنل کلروفرمDNA کیفیت مشابهی داشت. در مورد کمیت DNA بیشترین کمیت DNA استخراج شده در تمام نمونهها مربوط به روش جوشاندن بود (6.7µg/ml) و فقط در مورد نمونه اسلاید رنگ نشده بیشترین کمیت مربوط به روش فنل–کلروفرم بود. در حالیکه در برخی نمونهها روش فنل–کلروفرم و در برخی دیگر روش نمک زدن کمترین کمیت DNA استخراجی را داشتند. در مورد وضعیت PCR یا بازدهی DNA استخراج شده نمونه خون با هر سه روش 100% بازدهی را داشت. در حالیکه در نمونههای دیگر اسلاید مغز استخوان آرشیوی، اسلاید خون محیطی رنگ شده آرشیوی، اسلاید خون محیطی رنگ شده تازه و اسلاید خون محیطی رنگ نشده تازه بهترین بازدهی مربوط به روش جوشاندن بود(100% ، 88% ، 84% ، 72%).
نتیجهگیری: تحقیق حاضر نشان داد که استخراجDNA از نمونههای اسلایدهای مختلف به غیر از نمونه اسلاید خون محیطی رنگ نشده، نتایج خیلی مطلوبی دارد و ذخیره سازی اسلاید خون محیطی رنگ شده تأثیری در نتیجه استخراجDNA نخواهد داشت که این نتیجه برای مطالعات بعدی حائز اهمیت است.
واژههای کلیدی: استخراجDNA ، PCR، اسلاید مغز استخوان، اسلاید رنگ شده به روش گیمسا
نوع مطالعه:
پژوهشي |
موضوع مقاله:
عمومى دریافت: 1388/6/31 | انتشار: 1388/4/24