دوره 25، شماره 5 - ( مرداد 1396 )                   جلد 25 شماره 5 صفحات 370-361 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print

همسانه سازی، بیان و ارزیابی عملکرد پروتئین شبه الاستین: پروتئین نوین در مهندسی پزشکی
ندا رضایی نسب ، مهدی زین الدینی* ، علی رضا سعیدی نیا
چکیده:   (4582 مشاهده)
مقدمه: پروتئین شبه الاستین یا ELP یک پلیمر زیستی مصنوعی شامل توالی‌های تکراری از پنتا پپتید VPGXG (X می‌تواند هر اسیدآمینه به غیر از پرولین باشد) است. این پروتئین یک پلی پپتید واکنشگر دمایی است که دارای یک فاز انتقالی برگشت‌پذیر است. در دمای زیر دمای انتقالی (Tt)، مولکول ELP به شکل فضایی باز شده درآمده و بنابراین در محلول‌های آبی به‌صورت محلول در می‌آید؛ اما وقتی دما به بالاتر از Tt تغییر و افزایش می‌یابد، ELP به‌صورت غیر محلول و شبه آگریگه از محلول خارج می‌شود. هدف مطالعه اخیر، همسانه سازی، بیان و ارزیابی فعالیت ELP60 بر مبنای Tt است.
روش بررسی:‌ ابتدا ELP10 (150 بازی) سنتز و درون پلاسمید pBluescript همسانه سازی شد. سپس ELP60 (900 بازی) با استفاده از روش الحاق تکراری هدایت شونده (RDL) تولید شد. در نهایت ELP60 درون پلاسمید pET25 تغییر یافته زیر همسانه سازی شد و بیان ELP60 با استفاده از روش SDS-PAGE تایید گردید. همچنین پروتئین ELP60 بر مبنای Tt و انجام چرخه انتقالی معکوس (ITC) که بیانگر فعالیت ELP60 است، تخلیص گردید.
نتایج: نتایج نشان داد سازه بیانی pET-ELP60 تولید شد و بیان و تخلیص موفقیت‌آمیز ELP60 (در حدود 90%) در یک مرحله و بدون نیاز به ستون کروماتوگرافی صورت گرفت.
نتیجه‌گیری: از پروتئین نوترکیب تولیدی می‌توان در زمینه خالص‌سازی ساده و سریع پروتئین‌های دارویی نوترکیب، دارورسانی هوشمند و مهندسی بافت استفاده نمود.
واژه‌های کلیدی: همسانه‌سازی، پلی پپتید شبه الاستین، چرخه انتقالی معکوس، تخلیص، الحاق تکراری هدایت شونده.
متن کامل [PDF 856 kb]   (1227 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوشیمی
دریافت: 1395/10/9 | پذیرش: 1396/4/18 | انتشار: 1396/7/10
بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.