fa استفاده از سرم موش صحرایی تهیه شده در مرحله استروس برای بلوغ آزمایشگاهی تخمک های گاو عمومى General پژوهشي Original article مقدمه: لزوم بالغ سازی تخمک ها در محیط آزمایشگاهی به منظور بهبود شرایط باروری آزمایشگاهی( (IVFدر دهه اخیر مورد توجه محققین قرار گرفته است. معمولاً در محیط های کشت که به این منظور تهیه می شود از مکمل های هورمونی استفاده می گردد که تهیه آنها مشکل و بسیار گران است. استفاده از سرم موش صحرایی ماده در مرحله ی استروس که غنی از هورمون ها می باشد می تواند علاوه بر افزایش احتمال بالغ سازی، هزینه های مربوط را نیز کاهش دهد. روش بررسی: این مطالعه از نوع تجربی به منظور بررسی امکان استفاده از سرم موش صحرایی تهیه شده در مرحله استروس RSS ( (Rat Strus Serumبه جای سرم جنینی گاو(FBS) ومقایسه اثر آنها در محیط کشت جهت بالغ سازی تخمک های گاو انجام گردید. برای این منظور تعداد 1789 تخمک از تخمدان های گاو های ذبح شده طی یک سال در کشتار گاه جدا و پس از انجام مراحل شستشو، در سه محیط مختلف کشت داده شدند. محیط کشت کنترل حاوی TCM-199، آنتی بیوتیک، HCG و مایع فولیکولی (تهیه شده از فولیکول های قابل مشاهده بر روی تخمدان) و محیط های کشت دوم وسوم علاوه بر مواد مذکور به ترتیب حاوی FBSیا RSS بود. سرم موش صحرایی پس از تشخیص مرحله استروس با خونگیری از قلب و انجام مراحل غیر فعال سازی، تهیه و در دمای 20- درجه سانتیگراد تا زمان استفاده نگهداری گردید. پس ازکشت تخمک ها به مدت 24 ساعت درانکوباتور 5/38 درجه سانتیگراد، 5 درصد CO2و رطوبت 95 درصد، میزان بلوغ تخمک ها با توجه به پراکندگی سلول های کومولوس یا رنگ آمیزی استواورسئین و مشاهده جسم قطبی با میکروسکوپ نوری تعیین گردید. نتایج: اطلاعات به دست آمده توسط آزمون مربع کای مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج این تحقیق نشان داد که افزودن هر دو نوع سرم به طور معنی داری (P Introduction: Superovulation produces complications in some patients, so invitro maturation of oocytes is used to decrease or eliminate these complications and improve IVF. Moreover, IVM is used for different aspects of reproductive researches. Slaughterhouse ovaries are the main source of oocytes for IVM and IVF studies. Different media has been introduced and experimented for in vitro maturation of oocytes. Animal's serum at estrus stage contains different hormones and proteins which are essential for oocyte maturation. The aim of this study was to compare three culture media for in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes 1)(control)TCM-199, 2)HCG and follicular fluid (FF) and 3) antibiotic. Methods: Rat estrus serum (RSS) or fetal bovine serum (FBS) was added to control medium. Total of 1789 compact cumulus oocyte complexes (COCs) were aspirated from ovaries of slaughtered animals. Oocytes were randomly cultured in mentioned media and incubated in 38.5◦c, 5% CO2 and 95% humidity for 24 hours. The maturation of oocytes was judged according to cumulus cell expansion or randomly orcein stained oocytes and observation of polar bodies. Results: The results showed that maturation rate was significantly higher in second and third group (90.2%, 78.7%) as compared to the control group (p<0.001). There was no significant difference between second and third groups (90.2 % vs. 86.6%). Conclusion: RSS is as effective as FBS for IVM of bovine oocytes and can be used as an alternative. Bovine oocyte , IVM, Rat estrus serum 61 67 http://jssu.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-629&slc_lang=fa&sid=1 GA Jelodar غلامعلی جلودار . Jelodar@shirazu.ac.ir Yes S Hashemi سارا هاشمی No A Behahaddini امین الله بهاء الدینی No AR Rafati علی رضا رفعتی No