fa بررسی ایمنی‌زایی آنتی ژن BLF1 بورخوردریا سودومالئی با نانوذره PLGA در موش سوری ایمونولوژی Immunology پژوهشي Original article <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">مقدمه:</span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">باکتری <i>بورخوردریا سودومالئی</i> عامل بیماری میلوئیدوزیس در انسان بوده و از راه خوراکی، استنشاقی و یا از طریق خراش پوستی به انسان منتقل می‌شود. پروتئین </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">BLF1</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> این باکتری، در سلول‌های میزبان باعث توقف پروتئین</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span><span b="" nazanin="" style="font-family:">سازی می</span><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span><span b="" nazanin="" style="font-family:">شود. </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PLGA</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> به عنوان پلیمر زیست تخریب، جهت بارگذاری انواع مولکول های دارویی و پروتئینی، کاربرد دارد. هدف از این مطالعه، بیان</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌ </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">پروتئین </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">BLF1</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> توسط </span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">E coli</span></span></i><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و بارگذاری آن در پلیمر </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PLGA</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و بررسی ایمنی</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">زایی آن در موش</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">سوری می</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">باشد.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">روش بررسی:</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">در این پژوهش،</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">بیان ژن </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">blf1</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> به وسیله القای </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">IPTG</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> انجام و پروتئین نوترکیب با تکنیک وسترن‌بلات تایید شد. پس از تخلیص پروتئین، آنتی‌ژن درپلیمر </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PLGA</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> بارگذاری شد. سایز و پتانسیل زتای نانوذره حاوی پروتئین، اندازه</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">گیری شد. پروتئین همراه با ادجوانت؛ نانوذره </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PLGA</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PBS</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در دو و چهار نوبت به گروه</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">های موش تزریق شد. میزان آنتی‌بادی در سرم آنها توسط تست الایزا اندازه</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">گیری شد. در پایان موش</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">ها با سم </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">BLF1</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> چالش شدند. از نرم‌افزار</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">version 16 </span></span>&nbsp;<span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">SPSS</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> جهت آنالیز آماری استفاده شد.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتایج:</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> نانوذرات </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PLGA</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> حاوی پروتئین نسبت به نانوذرات فاقد پروتئین، اندازه </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PDI</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> بالاتر و پتانسیل زتای منفی</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">تری داشتند. میزان بارگذاری پروتئین در نانوذرات حدود 95% بود. نتابج تست چالش، حفاظت 50% گروه حاوی نانوذره و حفاظت 75% گروه حاوی پروتئین همراه ادجوانت را نشان می</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">دهد.</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span style="font-family:"B Nazanin""></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتیجه‌گیری:</span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">با توجه به دفعات تجویز و میزان تیترآنتی‌بادی پروتئین نوترکیب همراه با نانوذره و نتایج حاصله، این پروتئین می</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">‌</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">تواند به‌عنوان کاندید واکسن علیه بیماری میلوئیدوزیس مدنظر باشد.</span></span></span></span></span></span></span><br> &nbsp;</div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span calibri="" style="font-family:"><b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Introduction:</span></b> <span new="" roman="" style="font-family:" times="">The bacterium <i>Burkhordria pseudomallei</i> causes melioidosis in humans and can be transmitted to the patients through oral ingestion, inhalation or skin scratches. The BLF1 protein from this bacterium stops protein synthesis within host cells. PLGA serves as a biodegradable polymer for incorporating various pharmaceutical and protein molecules. The aim of this study was to express the BLF1 protein in E. coli and load it into PLGA polymer, and investigate its immunogenicity in mice.</span><b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Methods:</span></b> <span new="" roman="" style="font-family:" times="">In this research,</span><b> </b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">the blf1 gene expression was induced by IPTG, and the presence of the recombinant protein was confirmed using the western blot technique. Antigen was loaded in PLGA polymer. The size and zeta potential of nanoparticles containing protein were measured. Protein with adjuvant; nanoparticles PLGA and PBS were administered to the groups of mice in two and four doses. The level of antibody in their serum was measured using the ELISA test. Ultimately, mice were exposed to BLF1 toxin. The data were analyzed utilizing SPSS 16 software.</span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span calibri="" style="font-family:"><b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Results:</span></b><b> </b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">PLGA nanoparticles with protein exhibited a higher PDI size and a more negative zeta potential compared to those without protein. The amount of protein loading in nanoparticles was about 95%. The results of the challenge test indicated 50% protection of the group with nanoparticles and 75% protection of the group with protein plus adjuvant.</span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span calibri="" style="font-family:"><b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Conclusion:</span></b><b> </b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">According to the administration frequency and the antibody titer of the recombinant protein with nanoparticles, along with the results obtained, this protein may be considered as a potential vaccine candidate for melioidosis.</span><b><span style="font-family:"Times New Roman",serif"></span></b></span></span></span><br> &nbsp;</div> BLF1, PLGA, میلوئیدوزیس, بورخوادریا سودومالئی, کاندید واکسن BLF1, PLGA, myeloidosis, Borkhuadia pseudomallei, vaccine candidate. 8729 8742 http://jssu.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3798-2&slc_lang=fa&sid=1 Mahdi Dehati مهدی دهاتی کهنه‌شهری mahdi.dehati1377@gmail.comAuthor: Hossein Honari Address: Biological Science and Technology Center, 0000-0009-3077-6780 No Research Center of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University, Tehran, Iran مرکز علم و فناوری زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران. Hossein Honari حسین هنری honari.hosein@gmail.com 0000-0003-9116-3104 Yes Research Center of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University, Tehran, Iran مرکز علم و فناوری زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران. Davoud Sadeghi داود صادقی davudsadeghi64@yahoo.com 0000-0002-0952-7656 No Research Center of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University, Tehran, Iran مرکز علم و فناوری زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران. Seyed Mojtaba Aghaie سیدمجتبی آقایی kbmaghae@ihu.ac.ir 0000-0003-0201-9592 No Research Center of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University, Tehran, Iran مرکز علم و فناوری زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران.