fa بررسی تغییرات الگوی بیان ژن VEGF و القاء آپوپتوز در رده سلولی سرطان پستان MCF-7 تیمار شده با کروسین بیوشیمی Biochemistry پژوهشي Original article <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مقدمه:</span></span></strong> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">هدف گیری </span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">فاکتور رشد اندوتلیالی عروقی </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">VEGF</span></span></span></span></em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">)</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">) به</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">عنوان یک هدف درمانی در تومور</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های جامد و به خصوص سرطان پستان می</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باشد. به دلیل عدم ایجاد عوارض جانبی در سلول</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های سالم، استفاده از داروهای حاوی ترکیبات طبیعی در درمان سرطان در حال افزایش می</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باشد. کروسین به</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">عنوان ماده موثر زعفران نشان داده که اثرات بیولوژیکی مختلفی در انواع بدخیمی</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ها دارد. هدف از این مطالعه بررسی اثر کروسین بر مهار رشد، القاء آپوپتوز و الگوی بیان ژن </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">VEGF</span></span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در رده سلول سرطان پستان </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MCF-7</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> می</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باشد .</span></span></span><br> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">روش بررسی: در این مطالعه مداخله</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ای، اثر کروسین در القاء مرگ سلولی در غلظت</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های مختلف از 0 تا 8 میلی</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">گرم بر میلی</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">لیتر در زمان</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های 24 تا 48 ساعت به کمک تست رنگ سنجی </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> انجام شد. رنگ</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">آمیزی </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;Annexin&nbsp;V/PI&nbsp;</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و متود </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">realtime-PCR</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> به</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ترتیب برای بررسی نوع مرگ سلولی و ارزیابی الگوی بیان ژن </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">VEGF</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> به کار گرفته شد. به منظور تجزیه و تحلیل داده</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ها از نرم</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">افزار</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> SPSS V.16 </span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">آزمون غیر پارامتریک </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">ANOVA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> استفاده شد و مقادیر 05/0</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">p< </span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">&nbsp;معنی</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">دار در نظر گرفته شد.</span></span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتایج:</span></span></strong> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">سلول</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MCF-7</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> تیمار شده</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">با کروسین در مقایسه با گروه کنترل کاهش معنی‌داری در رشد و تکثیر در زمان 24 و 48 ساعت دریک روند وابسته به دوز و زمان نشان داد</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ند</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">. خروجی دستگاه فلوسایتومتری نشان از افزایش درصد سلول‌های آپوپتوتیک مطابق با افزایش غلظت کروسین داشت. هم</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">چنین کاهش بیان ژن </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">VEGF</span></span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در یک الگوی وابسته به زمان در سلول‌های تیمار شده مشاهده شد (05/0</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">p< </span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">)</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> <span style="color:black;">نتایج نشان می‌دهد که کروسین باعث القاء آپوپتوز وابسته به زمان و در عین حال کاهش بیان ژن </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">VEGF</span></span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در سلول‌های </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MCF-7</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> می‌شود. مطالعات بیشتری برای پی بردن به کارایی قطعی کروسین به</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">عنوان یک داروی ضد سرطان در درمان سرطان پستان ضروری می‌باشد.</span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Introdution:</strong> Targeting vascular endothelial growth factor (<em>VEGF</em>) is considered as a therapeutic goal in solid tumors; especially breast cancer. The use of drugs with natural compounds in the treatment of cancer is increasing because of exerting no adverse effects in normal cells. Crocin, as the main component of saffron, has been proved to have different biological activities on various types of malignancies. The aim of this study was to evaluate the effect of crocin on growth inhibition, induction of apoptosis and expression of <em>VEGF</em> in MCF-7 breast cancer cell line.<br> <strong>Methods:</strong> In this interventional study, MTT cytotoxic assay was performed to evaluate the cell death-inducing effects of crocin on MCF-7 cells growth at different concentrations ranging from 0 to 8 mg<span dir="RTL">/</span>mL for 24 to 48 hours. Annexin&nbsp;V/PI&nbsp;staining and realtime-PCR assay were used in order to determine the type of cell death and assess the changes in the expression pattern of <em>VEGF</em> gene, respectively. The nonparametric ANOVA test was applied for data analysis via SPSS software version 16 where <em>p-</em>value less than 0.05 were regarded statistically significant.<br> <strong>Results:</strong> Compared to untreated cells, crocin-treated MCF-7 cells demonstrated a significant decrease in growth at 24 and 48 hours in a dose- and time-dependent manner. Results of Flow-cytometry showed an increase in the percentage of apoptotic cells coincident with increased crocin concentration. Also, decreased expression of the <em>VEGF</em> in a time-dependent manner was observed p<0.05).<br> <strong>Conclusion:</strong> The results indicated that crocin induces marked apoptosis in a time-dependent manner while reducing the expression of <em>VEGF</em> in MCF-7 cells. More studies are required to confirm the efficacy of crocin as an anti-tumor agent for cancer therapies.</div> سرطان پستان, کروسین, فاکتور رشد اندوتلیال عروقی, آپوپتوز Breast cancer, Crocin, vascular endothelial growth factor, apoptosis. 845 856 http://jssu.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3764-1&slc_lang=fa&sid=1 Roya Saravani رویا سراوانی roya.saravani@gmail.com 0000-0001-8851-0977 No Master of Science in Chemistry, Nano science; Department of Chemistry, Iran of Science and Technology; Tehran, Iran. Saman Sargazi سامان سرگزی sgz.biomed@gmail.com 0000-0002-2255-5977 No Ph.D. Candidate of Clinical Biochemistry, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran, Mahboubeh Rabbani محبوبه ربانی m_rabani@iust.ac.ir 0000-0003-2992-0284 No Assistant Professor, Department of Chemistry, Iran of Science and Technology; Tehran, Iran Ramin Saravani رامین سراوانی saravaniramin@yahoo.com 0000-0003-1941-3617 Yes Associate Professor, Cellular and molecule Research Center; Department of Clinical Biochemistry, School of medicine, Zahedan University of Medical Sciences, Zahedan, Iran.