The Journal of Shahid Sadoughi University of Medical Sciences
مجله علمي پژوهشي دانشگاه علوم پزشكي شهید صدوقی يزد
JSSU
Medical Sciences
http://jssu.ssu.ac.ir
20
journal20
2228-5741
2228-5733
fa
jalali
1397
9
1
gregorian
2018
12
1
26
9
online
1
fulltext
fa
القاء آپوپتوز و افزایش بیان ژنهای P53 و PARP در سلولهای کارسینومای آناپلاستیک تیروئید انسان (SW-1736) به وسیله کورکومین (Curcumin)
Apoptosis induction and enhanced expression of p53 and PARP genes in the human anaplastic thyroid carcinoma cells line (SW-1736) with Curcumin
زیست شناسی
Biology
پژوهشي
Original article
<div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مقدمه:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> کارسینومای آناپلاستیک تیروئید (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">ATC</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">)، یکی از انواع بدخیمی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های غده تیروئید است که در نتیجه درگیری سلول</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های آناپلاستیک این غده ایجاد می</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">گردد. این نوع بدخیمی به شدت تهاجمی بوده و مبتلایان دارای پاسخ به درمان ضعیفی هستند. در این مطالعه اثر کورکومین بر میزان آپوپتوز و بیان ژن</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">p53</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">PARP</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در رده سلولی کارسینومای آناپلاستیک تیروئید انسان (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">SW-1736</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">) مورد بررسی قرار گرفت. کورکومین جزء اصلی و فعال موجود در ریزوم گیاه زرد چوبه (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Curcuma longa</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">) است که دارای اثرات آنتی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">اکسیدانی، ضد</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">التهابی، ضد تکثیری و پروآپوپتوزی می</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باشد.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">روش بررسی:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> مطالعه به</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">صورت تجربی در مهر ماه ۱۳۹۵ در مرکز تحقیقات سلولی-</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تکوینی دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد انجام شد. سلول­های رده </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">SW-1736</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> با غلظت</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های مختلف کورکومین شامل 5/2، 5، 5/7 و 10 میکرومولار برای بررسی آپوپتوز و غلظت</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های 5/2، 5 و 10 میکروکولار برای بررسی بیان ژن­های </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">p53</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">PARP</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> ظرف مدت 24، 48 و 72 ساعت انکوبه شدند. سپس میزان وقوع آپوپتوز با استفاده از دستگاه فلوسیتومتری و کیت انکسین- پروپیدیوم یدید (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Annexin-P1736) بهI</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">)، میزان بیان ژن­های </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">p53</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">PARP</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> از طریق آنالیز داده</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real Time- PCR</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و آنالیز آماری </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">با استفاده از آزمون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">ANOVA</span></span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">از طریق نرم افزار16 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">SPSS</span></span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و هم</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">چنین برنامه </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Excel</span></span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مورد بررسی قرار گرفت.</span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتایج:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> نتایج حاصل از این تحقیق حاکی از آن است که میزان القاء آپوپتوز در رده سلولی(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">SW-1736</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">) با افزایش غلظت کورکومین به</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">صورت وابسته به</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">دوز و زمان افزایش می</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">یابد. هم</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">چنین تیمار با کورکومین سبب افزایش معنی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">داری در بیان ژن­های </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">p53</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">PARP</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در برخی از گروه</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های آزمایشی نسبت به گروه کنترل گردید.</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">P=</span></span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">.032)</span></span></span><br>
<strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجهگیری:</span></span></strong> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">کورکومین از</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">طریق</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">القاء بیان</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ژن</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">دخیل</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مسیر</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">آپوپتوز</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">اثر</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مهاری</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">بر</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">رشد،</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تکثیر</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تهاجم</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">سلول</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">سرطانی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">آناپلاستیک</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تیروئید</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">دارد</span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> لذا به</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نظر می</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">رسد زمینه تحقیقاتی مناسبی برای بهره برداری از گیاه زردچوبه در کنترل و درمان کارسینومای آناپلاستیک تیروئید انسان وجود داشته باشد.</span></span></div>
<strong>Introdution:</strong>. Anaplastic thyroid carcinoma (ATC) is a type of thyroid gland malignancy that originates from the anaplastic cells of this gland. This kind of malignancy is highly invasive and patients have a poor response to treatment. In this study, the effect of curcumin on apoptosis and <em>p53</em> and <em>PARP</em> genes expression of the human anaplastic thyroid carcinoma cell line (SW-1736) examined. Curcumin is a major active ingredient in the rhizome of a Curcuma longa that has anti-oxidant, anti-inflammatory and pro-apoptosis effects.<br>
<strong>Methods:</strong> The experimental study was carried out in October, 2016 at the Cellular and Developmental Research Center of Islamic Azad University, Shahrekord Branch.SW-1736 cells with different concentrations of curcumin (2.5, 5, 7.5 and 10 μM) to examine apoptosis and 2.5, 5 and 10 μM concentrations to examine the expression of genes <em>P53</em> and <em>PARP</em> were incubated for 24, 48 and 72 hours. Then, apoptosis was analyzed by flow- cytometry using an Annexin V-FITC/PI kit and the expression of <em>p53</em> and <em>PARP</em> genes were analyzed by Real Time PCR.<br>
<strong>Results:</strong> The results of this study indicated that with increasing concentration of curcumin in dose and time dependent manner, induction of apoptosis in this cell line increased. Also, treatment with curcumin increased the expression of <em>p53</em> and <em>PARP</em> genes in some experimental groups compared to the control group. (P=.032)<br>
<strong>Conclusion:</strong> Curcumin has an inhibitory effect on the growth, proliferation and invasion of anaplastic thyroid cancer cells through induction of genes involved in apoptosis process. Therefore, it seems that there is a good research field for the use of Curcuma longa in the control and treatment of human anaplastic thyroid carcinoma.
کورکومین, آپوپتوز, PARP, SW-1736 , p53
Curcumin, Apoptosis, SW-1736, p53, PARP
759
769
http://jssu.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3568-1&slc_lang=fa&sid=1
Khalil
khashei varnamkhasti
خلیل
خاشعی ورنامخواستی