The Journal of Shahid Sadoughi University of Medical Sciences
مجله علمي پژوهشي دانشگاه علوم پزشكي شهید صدوقی يزد
JSSU
Medical Sciences
http://jssu.ssu.ac.ir
20
journal20
2228-5741
2228-5733
fa
jalali
1397
1
1
gregorian
2018
4
1
26
12
online
1
fulltext
fa
فرمولاسیون کمپلکس کاتیونی لیپوزوم- siRNA درمانگر جهت توسعه برای مقابله با استئوسارکوما
Formulation of a therapeutic cationic liposome-siRNA complex for development to fight osteosarcoma
فارماکولوژی
Pharmacology
پژوهشي
Original article
<strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مقدمه:</span></span></span></strong> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">لیپوزومهای کاتیونی بهعنوان جایگزینی برای حاملهای ویروسی برای رسانش ژن مطرح شده</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">اند. چالش عمده در رسانش </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">siRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">، ناپایداری لیپوزوم است که هم</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">چنان به عنوان یک مساله جدی است. هدف از این مطالعه ارائه فرمولاسیون لیپوزومی مناسب بهمنظور غلبه بر این ناپایداری است. </span></span></span><br>
<strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">روش بررسی:</span></span></span></strong> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در پژوهش حاضر (علمی-بنیادی به روش تجربی</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:arial,sans-serif;"><span style="font-size:12.0pt;">-</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">آزمایشگاهی)؛ فرمولاسیون لیپوزومی حاوی فسفاتیدیل کولین سویا، فسفولیپید کاتیونی </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">DOTAP</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">، کلسترول و پلی اتیلن گلیکول را از طریق روش آبپوشانی لایه نازک سنتز شده و </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">siRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> را از طریق انکوباسیون بر روی لیپوزومها بارگذاری گردید. در ادامه؛ بهینهسازی بارگذاری </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">siRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در دستور کار قرار گرفت. سپس پارامترهایی مربوط به سایز، پتانسیل زتا، شاخص پراکندگی، پایداری طولانی مدت کمپلکس لیپوزوم- </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">siRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> گزارش شد. دادهها به </span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">وسیله نرمافزار </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">GraphPad Prism</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> ورژن 7<span style="color:black;"> آنالیز شدند. تمامی دادهها با سه مرتبه تکرار همراه بوده و به صورت میانگین</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">±</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">انحراف معیار گزارش شدند. </span></span></span><br>
<strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتایج:</span></span></span></strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در این مطالعه موفق به تولید لیپوپلکس </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">siRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> با راندمان بالای بارگذاری </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">siRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> گردیدهایم. نانوذرات تولید شده کلوخهای نبوده و به مدت 3 ماه در دمای</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">˚C </span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> 4 پایدار بوده است. این نانوسامانه توانسته است با موفقیت </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">siRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> را به سلولهای سالم استخوانی برساند. بررسیها نشان از عدم سمیت سامانه</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">خالی (بدون ژن) داشته است. </span></span></span><br>
<strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجهگیری:</span></span></span></strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> لیپوزوم پگیله تهیه شده پتانسیل بالایی برای رسانش </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">siRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> به سلولهای استخوان دارد.</span></span></span><br>
<strong>Introdution:</strong> Cationic liposomes have been presented for gene delivery as an alternative vector instead of viral vectors. A major challenge associated with siRNA delivery is the instability of liposomes, which is still a serious problem. The aim of this study was to provide an appropriate formulation to overcome this instability.<br>
<strong>Methods:</strong> In the present study (Scientific-Fundamental, Experimental-Laboratory Study), liposomal formulation containing soy phosphatidylcholine, cationic DOTAP, cholesterol and polyethylene glycole was synthesized by thin-film hydration method and the siRNA were loaded on liposomes through incubation. In the following; the optimization of siRNA loading was on the agenda. Then the parameters related to size, zeta potential, polydispersity index and lon-term stability of siRNA-liposomes complex were reported. The Data were analyzed by GraphPad Prism version 7 Software. All data were repeated three times and reported as mean±standard deviation.<br>
<strong>Results:</strong> In this study we were able to produce siRNA lipoplex with high loading efficiency of siRNA. The produced nanoparticles did not agglomerate and were stable at 4 <sup>o</sup>C for 3 months. This nanosystem could successfully deliver siRNA to normal bone cells. Studies have shown that the blank system (no gene) had no toxicity.<br>
<strong>Conclusion:</strong> The prepared PEGylated liposomes have a great potential for delivery of siRNA to bone cells
لیپوپلکس siRNA, مشخصهیابی فیزیکوشیمیایی, جذب درون سلولی, زندهمانی سلولی.
SiRNA lipoplex, Physico-chemical characterization, Intracellular uptake, Cellular viability.
1027
1037
http://jssu.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3061-2&slc_lang=fa&sid=1
Bibi Fatemeh
Haghiralsadat
بی بی فاطمه
حقیر السادات
fhaghirosadat@gmail.com