The Journal of Shahid Sadoughi University of Medical Sciences

fa ردیابی ژن سنتزکننده توکسین نیوالنول در بذور روناس آلوده به قارچ‌های فوزاریوم با استفاده از PCR Detection of nivalenol synthesis gene in madder seeds infected by Fusarium species by PCR قارچ شناسی Mycology پژوهشي Original article مقدمه:روناس یکی از محصولات زراعی مهم می باشد که مصارف دارویی و صنعتی دارد. این محصول ممکن است توسط قارچهای گوناگونی از جمله قارچهای فوزاریوم که پتانسیل تولید مایکوتوکسینهای مهلکی را دارند، آلوده شود. هدف از این تحقیق شناسایی توکسینهای  تریکوتسین تولیدی توسط قارچهای فوزاریوم همراه بذور روناس با استفاده از روشهای مولکولی و بیوشیمیایی بود. روش بررسی: از بذور روناس در مناطق مهم کشت روناس استان یزد از جمله اردکان و بافق نمونه برداری به عمل آمد. پس از کشت و خالص سازی گونه های قارچی فوزاریوم در محیطهای کشت اختصاصی، ردیابی قارچهای دارای پتانسیل تولید مایکوتوکسین تریکوتسین از جمله نیوالنول (NIV) از طریق آغازگرهای اختصاصی ژن Tri13 با استفاده از روش واکنش زنجیرهای پلی مراز (PCR) انجام شد. جهت تایید پتانسیل تولید مایکوتوکسین NIV در گونه های فوزاریوم از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) استفاده شد. یافته ها: در این بررسی پنج گونه فوزاریوم شامل solani.F، F.oxysporum ،poae .F،  semitectum.F و F.eqiuesti  از بذور روناس جداسازی و شناسایی شدند. از بین گونه های فوزاریوم جدا شده از بذور روناس گونه های poae F.  و equisetiF. توانایی تولید مایکوتوکسین نیوالنول (NIV) را دارا بودند. وجود ژن Tri13 (موثر در تولید نیوالنول) در دو گونه  F.poae و  .equisetiF ردیابی گردید که این گونه ها بعنوان تیپهای تولیدکننده NIV شناخته شدند. نتایج حاصل از HPLC  نیز نشان داد که دو گونه فوزاریوم مورد بررسی، پتانسیل تولید مایکوتوکسین NIV را دارند. نتیجه گیری: بر اساس نتایج بدست آمده، ژن Tri13 در دو گونه .poaeF و F. equiseti نقش موثری در تولید تریکوتسین نیوالنول دارد. لذا با استفاده از روش PCR میتوان قارچهای دارای پتانسیل تولید مایکوتوکسین را در محصولات مختلف سریعتر ردیابی و شناسایی کرد. با توجه به اینکه این اولین گزارش از وجود تریکوتسین نیوالنول در بذور روناس در استان یزد می باشد، لذا باید اقدامات لازم جهت کنترل این عوامل قارچی و توکسینهای تولیدی در این محصولات صورت گیرد.  Introduction: The madder (Rubia tinctorum) is one of the most important crops for medical and industrial applications. This product maybe infected by Fusarium species that produces potentially fatal mycotoxins. The purpose of this current research is to identify toxins produced by madder seeds-associated Fusarium fungi using molecular and biochemical methods. Methods: From major areas of cultivation of madder seeds in Yazd province including, Ardekan and Bafgh, sampling was done. Culture and purification of Fusarium isolates were taken place in specific media. Detection of fungi with the ability to produce trichothecenes mycotoxins such as nivalenol (NIV) through gene-specific primers for Tri13 by the polymerase chain reaction method (PCR) was performed. To confirm the NIV production potential, high performance liquid chromatography (HPLC) was applied. Results: In this study, five Fusarium species including F.solani, F.oxysporum, F. poae, F. semitectum, and F. eqiuesti were identified from madder seeds. The results showed that among Fusarium species isolated from madder seeds, F. poae  and F. equiseti have the ability to produce NIV. The gene involved in NIV synthesis, Tri13, was detected in two species so that all these isolates were identified as NIV producing type. The HPLC performance showed that all studied Fusarium species, have the potential to produce NIV mycotoxin. Conclusion: Based on results, Tri13 gene has a crucial role in trichothecene produce. Thus, the PCR method can be used in various products for faster detection of fungi have the potential mycotoxin production. Given that this is the first report of NIV trichothecene in seeds of madder in Yazd, a proscriptive measure should be taken to control and reduce the fungal and toxin production in these products. روناس, بذور, فوزاریوم, نیوالنول madder, seeds, Fusarium, NIV 952 962 http://jssu.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2548-1&slc_lang=fa&sid=1 Seyyed-Mohsen Hosseininejad سید محسن حسینی نژاد hosseininejad.s.mohsen@gmail.com No Golestan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی گرگان Mostafa abedi-tizaki مصطفی عابدی تیزکی m.abeditizaki@gmail.com Yes بخش تحقیقات گیاه پزشکی مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی استان یزد، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، یزد، ایران Seyyed Alireza Esmailzadeh Hosseini سید علیرضا اسمعیل زاده حسینی saesmailzadeh@iripp.ir No بخش تحقیقات گیاه پزشکی مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی استان یزد، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، یزد، ایران fatemeh kargar فاطمه کارگر dr.fatemeh.kargar@gmail.com No Shahid Sadoughi University of Medical دانشگاه شهید صدوقی یزد kamal Sadeghi-Khomartaji کمال صادقی خمارتاجی k.sadeghi313@yahoo.com No بخش تحقیقات گیاه پزشکی مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی استان یزد، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، یزد، ایران