fa تأثیر آدنوزین ´5تری فسفات در القای آپوپتوز و مهار بیان ژن Survivin و واریانت پیرایشی ضد آپوپتوزی SUR-3B آن در سلول های K562 عمومى General پژوهشي Original article مقدمه: لوسمی یک بیماری بدخیم محسوب می شود که در آن پیشرفت بیماری در سطح سلول های CD34+، اثرات عمده ای در مقاومت به دارو و عود مجدد بیماری داشته و همزمان، پروتئین های مهار کننده ی آپوپتوز (IAPs) نظیر Survivin و نیز پروتئین P-Glycoprotein به عنوان محصول ژن مقاومت به دارو در این سلول ها سبب بروز مقاومت به آپوپتوز و در نهایت مقاومت به دارو و شیمی درمانی می شود. اخیرا گزارش شده است که آدنوزین ́5-تری فسفات (ATP) قادر به مهار رشد و القای آپوپتوز در چندین رده ی سلولی میلوئیدی می باشد که در این میان، رده ی سلولی K562‌ به عنوان مدلی برای لوسمی میلوئید مزمن (CML) دارای خصوصیات ویژه ای در بیان Survivin و سایر ژن های مرتیط با مقاومت دارویی می باشد. به همین منظور در مطالعه ی حاضر اثر ATP‌ بر رده ی سلولی K562 و بیان ژن Survivin و واریانت های پیرایشی آن مورد مطالعه قرار گرفته است. روش بررسی: رده ی سلولی K562 انسانی پس از کشت، تحت تأثیر ATP در غلظت و فواصل زمانی گوناگون قرار گرفت. اثرات ATP بر رشد و زیستایی سلول های K562 با استفاده از شمارش سلولی توسط هموسایتومتر و آزمون دفع رنگ تریپان بلو بررسی شد. برای بررسی آپوپتوز میکروسکوپ فلورسانت و آزمون قطعه قطعه شدن DNA استفاده شده بیان ژن Survivin و واریانت های پیرایشی آن با استفاده از تکنیک RT-PCR نیمه کمی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: مطالعه ی حاضر نشان می دهد که ATP سبب مهار رشد وابسته به زمان و غلظت و القای آپوپتوز می شود. همچنین ATP سبب کاهش بیان ژن Survivin و واریانت ضد آپوپتوزی Sur-3B‌ آن می گردد(05/0P<). سطح بیان دیگر واریانت های پیرایشی (ΔEx3، 2b، 2α و 3α) تغییر معناداری نشان نمی دهد. نتیجه گیری: با توجه به اثر ATP در کاهش بیان Survivin و واریانت پیرایشی Sur-3B و القای آپوپتوز این ترکیب می تواند در کنار سایر ترکیبات دارویی برای کاهش مقاومت دارویی مورد استفاده قرار گیرد. Introduction: Leukemia is a heterogeneous malignant disease in which progression at the level of CD34+ cells has a major impact in drug resistance and relapse. The multi-drug resistance gene product, P-glycoprotein is an inhibitor of apoptosis proteins (IAPs), such as Survivin that are expressed simultaneously with several putative drug resistance parameters in CD34+ leukemia cells. In fact, IAPs over-expression and their anti-apoptotic splice variants are associated with CD34 positivity, poor response to chemotherapy and reduced overall survival in leukemic patients. Recently, adenosine 5ʹ-triphosphate (ATP) has been reported to inhibit proliferation and induce apoptosis in several human cell lines. The K562 CD34+ human myeloid leukemia cell line has the unique feature of expressing significant functional IAPs and other drug-resistance genes. Thus, the efficacy of ATP in overcoming the resistance and expression profile of Survivin and its splice variants were examined in K562 cells in the present study. Methods: K562 cell were cultured and treated several times with different concentrations of ATP. Apoptosis was studied by fluorescent microscopy(Ao/EtBr double staining) and DNA fragmentation assay. The expression level of Survivin and its splice variants was studied by semiquantative RT-PCR method. Results: The results showed that over-expression of Survivin and its anti-apoptotic splice variant, 3b splice variant were decreased after treatment by ATP in a time- and dose-dependent manner. The expression levels of other splice variants (ΔEx3, 2b, 2α and 3α) did not show significant difference between the control and the treated cells. Conclusion: The results showed that ATP attenuated expression of Survivin and its anti-apoptotic splice variant, meaning that this nucleotide can facilitate apoptosis in drug-resistant leukemia cells. In addition, combination of ATP with standard chemotherapies may be utilized for inhibition of drug-resistance in leukemia cells. آپوپتوز- مقاومت دارویی- ATP، K562- لوسمی- Survivin Apoptosis, Drug Resistanc; Aeromonas Hydrophila; Leukemia 369 379 http://jssu.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-947&slc_lang=fa&sid=1 M Hosseinpour Feizi محمد علی حسینپور فیضی No M Moosavi سید محمد امین موسوی moosav_m@tabrizu.ac.ir Yes A Ahmadi امیر حسین احمدی No A Movafeghi علی موافقی No