fa استخراج، تعیین هویت و فریز کردن سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی انسان به روش آنزیمی سایر other پژوهشي Original article <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">مقدمه:</span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">سلول‌های بنیادی مزانشیمی به دلیل توانایی بالا در تمایز به رده‌های مختلف سلولی و ترشح فاکتورهای ترمیمی در مطالعات بازسازی بافت دارای اهمیت زیادی می‌باشند. در میان منابع مختلف این سلول‌ها، بافت چربی به دلیل دسترسی آسان، بازدهی بالا و تهاجم کم منبع مهمی به‌شمار می‌رود. این مطالعه با هدف جداسازی سلول‌های بنیادی مشتق از بافت چربی با استفاده از آنزیم کلاژناز </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">I</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و بررسی ویژگی‌های سلول‌های به‌دست آمده جهت ایجاد بانک سلولی برای مرکز کشت سلول گروه علوم تشریح انجام گردید.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">روش بررسی:</span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">در این مطالعه سلول‌های چربی حاصل از لیپوساکشن تهیه گردید و با استفاده از آنزیم کلاژناز سلول‌ها استخراج و جداسازی شدند. سلول‌های جدا شده در محیط کشت مناسب کشت داده شد و سپس مارکرهای سطحی سلول‌های مزانشیمی با استفاده از آزمون فلوسیتومتری ارزیابی گردید. هم‌چنین توانایی تمایز سلول‌ها به رده‌های چربی و استخوان از طریق القا تمایز اختصاصی و انجام رنگ‌آمیزی‌های مربوطه مورد سنجش قرار گرفتند. در نهایت سلول‌ها فریز شده و برای نگهداری در تانک ازت قرار گرفتند.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتایج:</span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">ماهیت سلول‌های مزانشیمی با بیان بالای مارکرهای سطحی 90</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">CD</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و 73</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">CD</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و بیان پایین مارکرهای خونی مانند 34</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">CD</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و 45</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">CD</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> مورد تایید قرار گرفت. هم‌چنین رنگ‌آمیزی اویل رد و آلیزارین رد به ترتیب تایید کننده تمایز سلول‌ها به سمت چربی و استخوان بود.</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span style="font-family:"B Nazanin""></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتیجه‌گیری:</span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتایج مطالعه نشان داد که سلول‌های استخراج شده با روش آنزیمی کلاژناز، ویژگی‌های مورفولوژیکی، ایمنوفنوتیپی و عملکردی منطبق با معیارهای سلول‌های بنیادی مزانشیمی را دارا بوده و قابلیت بالایی برای کاربردهای مهندسی بافت و طب بازساختی دارند.</span></span></span></span></span></span></span><br> &nbsp;</div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span calibri="" style="font-family:"><b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Introduction:</span></b> <span new="" roman="" style="font-family:" times="">Mesenchymal stem cells (MSCs) play a significant role in regenerative research due to their strong self-renewal capacity, their ability to differentiate into various cell lineages, and their secretion of trophic and regenerative factors. Among different cell sources, adipose tissue is considered particularly valuable because of its easy accessibility and high yield. The aim of this study was to isolate adipose-derived mesenchymal stem cell using collagenase type I and to characterize the isolated cells for establishing a cell bank at the Cell Culture Center of the Department of Anatomy</span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span calibri="" style="font-family:"><b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Methods:</span></b><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> In this study, adipose tissue samples obtained through liposuction were enzymatically digested using collagenase type I to isolate the cells. The isolated cells were cultured in an appropriate culture medium, and the expression of mesenchymal surface markers was then analyzed by flow cytometry. In addition, the differentiation potential of the cultured cells toward adipogenic and osteogenic lineages was also evaluated through lineage-specific induction followed by appropriate staining procedures. Finally, the cultured cells were cryopreserved and stored in a liquid nitrogen for long-term preservation.</span><span style="font-family:"Times New Roman",serif"></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span calibri="" style="font-family:"><b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Results:</span></b><b> </b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">The mesenchymal phenotype of the isolated cells was confirmed by the high expression of CD90 and CD73 and the low expression of hematopoietic markers CD34 and CD45. Oil Red O and Alizarin Red staining further verified the adipogenic and osteogenic differentiation of the cells, respectively.</span><span style="font-family:"Times New Roman",serif"></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:18.0pt"><span calibri="" style="font-family:"><b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Conclusion:</span></b><b> </b><span new="" roman="" style="font-family:" times="">The results of this study demonstrated that the cells isolated using the collagenase enzymatic method exhibited morphological, immunophenotypic, and functional characteristics consistent with the standard criteria for mesenchymal stem cells, indicating their strong potential for applications in tissue engineering and regenerative medicine.</span></span></span></span><br> &nbsp;</div> سلول بنیادی, جداسازی سلولی, آنزیم کلاژناز, تمایز سلولی Stem cell, Cell isolation, Collagenase enzyme, Cell differentiation. 10039 10050 http://jssu.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4067-1&slc_lang=fa&sid=1 Raziyeh Taghizadeh Ghavamabadi راضیه تفی زاده قوام آبادی raz.taghizadeh@ut.ac.ir 0000-0001-7386-4086 No Department of Basic Science, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Iran. دانشجوی Phd بافت شناسی، گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران. Hassan Morovvati حسن مروتی hmorovvati@ut.ac.ir 0000-0003-0275-1636 Yes Department of Basic Science, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Iran. گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران. Zahra Taghipour زهرا تقی‌پور dr.taghipour@rums.ac.ir 0000-0002-6670-724X No Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medicine, Rafsanjan University of Medical Sciences, Rafsanjan, Iran. گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان، رفسنجان، ایران.