مقدمه:توکسوپلاسمایک انگل داخل سلولی اجباری است که دارای دامنه میزبان وسیعی در میان پستانداران و پرندگان است، پروتئین‌های توکسوپلاسما آنتی‌ژن‌های قوی می‌باشند که قادرند واکنش‌های ایمنی قوی را شروع کنند.یکی از این نوع راپتری پروتئین 1 توکسوپلاسما گوندیی(ROP1) است.ROP1 یکی از رقابت کننده‌های واکسن‌های نوترکیب بر علیه توکسوپلاسما می‌باشد. بنابراین هدف از این مطالعه کلونینگ و بیان ROP1 در یک کلونینگ وکتور((PUET1 و ساخت این آنتی‌ژن نوترکیب برای استفاده‌های بعدی است. روش بررسی:پس از استخراج DNA و تکثیر با روش PCR محصول در کلونینگ وکتورPUET1 در مکان آنزیم‌های محدودکننده BamH1 و EcoR1کلون شد و به داخل سلول میزبان BL21plsS انتقال یافت. همچنین جهت ایجادوکتور یوکاریوتی،pcROP1 در pcDNA3 در مکان‌های Hind111 و ٍEcoR1 ساب کلون شد و نتایج با هضم آنزیمی و توالی یابی بررسی شد. حال این آنتی‌ژن‌نوترکیب با IgM و IgGELISA پوشانده شد. نتایج:یک قطعه 757 جفت‌بازی جداسازی شد و آنالیز توالی یک همولوژی در حد 96 درصد را با توالی ژن در سایت No. M71274.)Gene Bank)نشان داد.نتایج الایزا نشان داد IgMELISA ROP1 با بیشترین تعداد نمونه‌های IgM مثبت واکنش می‌دهد. نتیجه‌گیری:آنتی‌ژن‌نوترکیب ROP1 در یک تست IgM Rec-ELISA می‌تواند جایگزین آنتی‌ژن تاکی زوئیت در تست‌های سرولوژیکی IgM و IgG شود.

واژه‌های کلیدی: توکسوپلاسما گوندیی، آنتی‌ژن نوترکیب، ژنROP1

متن کامل [PDF 557 kb]   (2422 دریافت)