مقدمه: روشهای استخراج DNA برای انجام تحقیقات ژنتیک و همین طور آزمایشات تشخیص طبی جهت بیماریهایی که منشاء ژنتیک دارند حائز اهمیت است. همچنین در مورد سرطانها استفاده از روشهای استخراجDNA و بررسی ژنی در طول مراحل درمان، بعنوان یکی از روشهای آزمایشگاهی مطرح میباشد. حال بررسی آنکه کدام روش استخراج DNA و استخراج از چه نمونهای بهترین نتیجه را می دهد بسیار مهم خواهد بود. روش بررسی: در این تحقیق از ٥ نمونه مختلف شامل ١- خون ٢- اسلاید مغز استخوان آرشیوی رنگ شده به روش گیمسا ٣- اسلاید خون محیطی آرشیوی رنگ شده به روش گیمسا ٤- اسلاید خون محیطی تازه رنگ شده به روش گیمسا و ٥- اسلاید خون محیطی رنگ نشده، با سه روش ١- نمک زدن٢- جوشاندن و ٣- فنل– کلروفرم،DNA استخراج شد. در این تحقیق سه پارامتر کیفیت (Optimal Density:OD)، کمیت (غلظت DNA ) و بازدهی یا وضعیت PCR:Polymerase Chain Reaction مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: بهترین کیفیت در نمونه خون با روش نمک زدن (74/1) و کمترین کیفیت در تمام نمونههای مورد بررسی با روش جوشاندن حاصل شد و در مورد اکثر نمونهها روش نمک زدن و فنل کلروفرمDNA کیفیت مشابهی داشت. در مورد کمیت DNA بیشترین کمیت DNA استخراج شده در تمام نمونهها مربوط به روش جوشاندن بود (6.7µg/ml) و فقط در مورد نمونه اسلاید رنگ نشده بیشترین کمیت مربوط به روش فنل–کلروفرم بود. در حالیکه در برخی نمونهها روش فنل–کلروفرم و در برخی دیگر روش نمک زدن کمترین کمیت DNA استخراجی را داشتند. در مورد وضعیت PCR یا بازدهی D‏NA استخراج شده نمونه خون با هر سه روش 100% بازدهی را داشت. در حالیکه در نمونههای دیگر اسلاید مغز استخوان آرشیوی، اسلاید خون محیطی رنگ شده آرشیوی، اسلاید خون محیطی رنگ شده تازه و اسلاید خون محیطی رنگ نشده تازه بهترین بازدهی مربوط به روش جوشاندن بود(100% ، 88% ، 84% ، 72%). نتیجهگیری: تحقیق حاضر نشان داد که استخراجDNA از نمونههای اسلایدهای مختلف به غیر از نمونه اسلاید خون محیطی رنگ نشده، نتایج خیلی مطلوبی دارد و ذخیره سازی اسلاید خون محیطی رنگ شده تأثیری در نتیجه استخراجDNA نخواهد داشت که این نتیجه برای مطالعات بعدی حائز اهمیت است. واژههای کلیدی: استخراجDNA ، PCR، اسلاید مغز استخوان، اسلاید رنگ شده به روش گیمسا

متن کامل [PDF 134 kb]   (32363 دریافت)